Le colorant réticulocytes pour les analyseurs d’hématologie Sysmex permet une coloration ciblée des acides nucléiques fluorescents pour les plates-formes de cytométrie en flux laser à semi-conducteurs. Le réactif liquide pénètre dans les cellules sanguines nucléées, les réticulocytes et les plaquettes pour se lier sélectivement à l'ARN et à l'ADN intracellulaires, générant ainsi des signaux de fluorescence latérale et de diffusion de la lumière spécifiques à travers les canaux de détection désignés. Formulée pour une intégration directe avec des systèmes fluidiques automatisés, la solution maintient une intensité de fluorescence stable, un faible bruit de fond et des performances reproductibles d'un lot à l'autre dans les laboratoires cliniques.
Que sont les réactifs de coloration/colorant d’hématologie ?
Les réactifs colorants hématologiques automatisés sont des marqueurs fluorescents liquides conçus pour les plates-formes d'analyse cellulaire basées sur la -cytométrie en flux-. Contrairement aux taches de sang manuelles traditionnelles utilisées en microscopie optique, ces colorants liquides pénètrent dans les cellules cibles via une perméabilisation membranaire contrôlée pour marquer les acides nucléiques intracellulaires. Sous excitation laser à semi-conducteur à l'intérieur de la cellule à flux optique, les structures cellulaires marquées émettent des signaux de fluorescence latérale et de diffusion de la lumière, permettant à l'optique du système de générer des diagrammes de dispersion bidimensionnels précis et des distributions de grappes de cellules.
Rôle dans la classification/détection cellulaire
En analyse optique d'hématologie, les colorants fluorescents permettent une discrimination cellulaire différentielle en quantifiant la densité d'acide nucléique intracellulaire :
Différence de globules blancs :Sépare les lymphocytes, les monocytes, les neutrophiles, les éosinophiles et les basophiles en fonction des rapports ARN/ADN et de la structure cytoplasmique.
Identification des cellules atypiques et immatures :Identifie les cellules blastiques et les granulocytes immatures via une intensité d'émission de fluorescence élevée.
Dénombrement des réticulocytes :Mesure l'ARN ribosomal résiduel dans les jeunes globules rouges pour évaluer l'activité érythropoïétique de la moelle osseuse.
Comptage optique des plaquettes :Résout les plaquettes géantes et différencie les fragments de globules rouges des plaquettes à l’aide du déclenchement de fluorescence de l’acide nucléique cible.
Canal de détection
Le colorant fluorescent fonctionne sur des canaux optiques automatisés spécifiques :
Chaîne WNR :Compte les globules blancs et isole les globules rouges nucléés par coloration différentielle des acides nucléiques.
Chaîne WDF :Différencie les sous-populations de leucocytes matures et détecte les granulocytes immatures à l’aide de paramètres de fluorescence latérale et de diffusion latérale.
Canal WPC :Dépistage des cellules progénitrices et des lymphocytes anormaux en fonction de la densité nucléaire et de la perméabilité différentielle des membranes.
Canal RET :Mesure les fractions de réticulocytes et les paramètres optiques des globules rouges grâce à l’intensité de la fluorescence de l’ARN.
Canal PLT :Étiquete les acides nucléiques plaquettaires pour éliminer les interférences microcytaires des globules rouges lors du comptage optique.
Série d'analyseurs compatibles
Formulé pour un alignement opérationnel direct avec des plates-formes d'hématologie automatisées utilisant la cytométrie en flux laser à semi-conducteur :
Série XN :XN-1000, XN-2000, XN-3000, XN-9000, séries XN-L (XN-350, XN-450, XN-550)
Série XS :XS-500i, XS-800i, XS-1000i
Série XT :XT-1800i, XT-2000i, XT-4000i
Série XE :XE-2100, XE-5000
Spécifications du produit
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Paramètre |
Spécification technique |
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Forme physique |
Solution liquide, claire à jaune clair |
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Longueur d'onde d'excitation |
633 nm/635 nm |
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Longueur d'onde d'émission |
650 nm – 670 nm |
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Liaison cible |
Acide ribonucléique (ARN) et acide désoxyribonucléique (ADN) |
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CV de lot-à-lot |
< 2.0% (SFL channel) |
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Filtration des particules |
Membrane absolue de 0,2 µm filtrée |
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Plage de pH |
7h20 – 7h50 à 25 degrés |
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Osmolalité |
280 – 320 mOsm/kg |
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Norme de qualité |
Conforme aux normes ISO 13485 / CE IVD |
Fonction d'application et de réactif
Coloration du canal WNR (STAC-DYE-SYSWNR) :Perméabilise les membranes cellulaires pour permettre une entrée rapide du colorant nucléaire, séparant les noyaux NRBC intacts des globules blancs pour une génération précise du pourcentage de NRBC et du nombre de leucocytes.
Coloration du canal WDF (STAC-DYE-SYSWDF) :Colore les acides nucléiques intracellulaires des leucocytes pour générer des groupes de scattergrammes distincts pour les neutrophiles, les lymphocytes, les monocytes et les éosinophiles.
Coloration du canal WPC (STAC-DYE-SYSWPC) :Colore sélectivement les cellules blastiques et les lymphocytes anormaux en fonction de la composition lipidique et de la densité nucléaire pour le marquage des cellules secondaires.
Coloration du canal RET (STAC-DYE-SYSRET) :Se lie à l'ARN résiduel dans les globules rouges immatures, permettant le calcul du pourcentage total de réticulocytes, du nombre absolu et de la fraction de réticulocytes immatures.
Coloration du canal PLT (STAC-DYE-SYSPLT) :Étiquete les acides nucléiques plaquettaires pour éviter les interférences des globules rouges microcytaires lors des mesures optiques de plaquettes à faible nombre -.
Emballage / Stockage
Configurations d'emballage :
- Cassettes à cartouches : 2 × 12 mL
- Solution en bouteille : 1 × 50 mL, 1 × 100 mL, 1 × 500 mL
Température de stockage :2 degrés à 30 degrés (protéger de la lumière directe et du gel)
Durée de conservation non ouverte :18 mois
À bord-Stabilité :60 jours dans des conditions ambiantes de laboratoire
Réactifs d'hématologie associés
Solutions diluantes pour hématologie :Solutions tampons isotoniques maintenant l’intégrité du volume cellulaire et contrôlant la conductivité des fluides pendant les mesures physiques.
Réactifs de lyse pour le différentiel leucocytaire :Solutions actives qui lysent sélectivement les globules rouges pour préparer les globules blancs à l’analyse optique.
Solutions de nettoyage pour analyseurs :Fluides de lavage enzymatiques conçus pour éliminer l’accumulation de protéines et les résidus de teinture des lignes fluidiques internes et des cellules à flux optique.
Fluides de gaine concentrés :Fluides hydrodynamiques formulés pour centrer les flux d’échantillons à l’intérieur des chambres de détection optique.
FAQ
Q : Comment ce colorant empêche-t-il le chevauchement des signaux entre les réticulocytes et les globules rouges matures ?
R : Le colorant cible les brins d’ARN présents dans les réticulocytes. Les globules rouges matures ne contiennent ni ARN ni ADN fonctionnels, n'émettant aucune fluorescence de fond sous excitation laser, ce qui crée une séparation de base distincte sur les scattergrammes optiques.
Q : Quelle est la stabilité du flacon ouvert-du réactif une fois chargé dans l'instrument ?
R : La formulation liquide reste stable à bord-jusqu'à 60 jours entre 2 degrés et 30 degrés. Les agents de stabilisation empêchent les changements de concentration et maintiennent une émission de fluorescence constante tout au long du cycle d'utilisation.
Q : Des ajustements matériels ou logiciels sont-ils nécessaires lors de l’introduction de ce réactif colorant ?
R : Le réactif correspond aux paramètres physiques-chimiques standards, aux courbes de réponse à l'excitation et à la viscosité fluidique, permettant un fonctionnement direct selon les protocoles d'étalonnage du système établis.
Q : Comment la formulation liquide protège-t-elle les cellules à circulation optique de l’accumulation de particules ?
R : Les solutions sont traitées à travers des filtres à membrane absolue de 0,2 µm lors de l'emballage final. La structure du colorant non agrégée empêche la formation de micro-particules et l'accumulation de résidus dans les conduites fluidiques et les buses.
Q : Quelle documentation accompagne les expéditions par lots pour la vérification de la qualité ?
R : Les livraisons comprennent un certificat d'analyse (CoA), une fiche de données de sécurité (SDS), des dossiers de tests de lots et une documentation de conformité ISO 13485.
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