Le colorant WDF pour analyseurs d'hématologie Sysmex en 5 parties est un réactif fluorescent spécialisé formulé pour la cytométrie en flux optique automatisée, pénétrant les membranes perméabilisées des globules blancs pour lier les acides nucléiques cellulaires pour le comptage différentiel des cellules et la séparation des scattergrammes.
Que sont les réactifs de coloration/colorant d’hématologie ?
Les réactifs de colorants hématologiques automatisés sont des solutions de fluorophores spécialisées conçues pour les canaux de détection optique à l'intérieur de compteurs de cellules multi-paramètres. Contrairement aux colorations manuelles des frottis sanguins utilisées en microscopie conventionnelle, ces réactifs contiennent des composés fluorescents synthétiques dissous dans des solvants organiques. Lors de la préparation cellulaire automatisée, le réactif pénètre dans les cellules lysées pour se lier à l’ARN et à l’ADN intracellulaires, produisant ainsi des signaux de fluorescence spécifiques sous excitation laser.
Rôle dans la classification/détection cellulaire
Les réactifs colorants fluorescents permettent une identification cellulaire multi-dimensionnelle en mesurant la diffusion de la lumière et l'intensité de la fluorescence à l'intérieur de la Flow Cell.
Liaison des acides nucléiques :Le fluorophore se lie à l’ARN et à l’ADN intracellulaires, émettant une intensité lumineuse proportionnelle à la teneur en acides nucléiques cellulaires et à l’activité métabolique.
Différentiel leucocytaire :Sépare les lymphocytes matures, les monocytes, les neutrophiles et les éosinophiles en groupes distincts sur des scattergrammes bidimensionnels -.
Marquage cellulaire anormal :Identifie les lymphocytes atypiques et les cellules immatures sur la base de signaux fluorescents élevés provenant de concentrations plus élevées d’ARN et d’ADN.
Canal de détection
Les analyseurs d'hématologie automatisés en 5 parties utilisent des canaux de réaction fluorescents discrets pour traiter des populations cellulaires spécifiques :
Chaîne WDF :Mesure le nombre différentiel de globules blancs, les lymphocytes atypiques et les granulocytes immatures en utilisant la fluorescence latérale et la diffusion latérale.
Chaîne WNR :Analyse le nombre total de globules blancs et de globules rouges nucléés en isolant les signaux de fluorescence nucléaire.
Canal WPC :Dépiste les cellules précurseurs, les lymphocytes anormaux et les populations de cellules progénitrices.
Canal RET :Quantifie les réticulocytes et les érythrocytes matures en ciblant l'ARN ribosomal intracellulaire.
Canal PLT :Fournit une numération optique des plaquettes à l’aide de marqueurs fluorescents pour éviter les interférences des fragments cellulaires ou des érythrocytes microcytaires.
Série d'analyseurs compatibles
Analyseurs d'hématologie automatisés en 5 parties :Plates-formes modulaires-à haut débit, unités autonomes-au sol et systèmes de paillasse compacts.
Identifiants de produit correspondant :STAC-DYE-SYSWNR, STAC-DYE-SYSWDF, STAC-DYE-SYSWPC, STAC-DYE-SYSRET, STAC-DYE-SYSPLT
Spécifications du produit
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Paramètre |
Spécification |
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Modèle de produit |
STAC-DYE-SYSWDF |
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Canal cible |
WDF (différentiel de globules blancs) |
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Molécule active |
Composé fluorescent polyméthine |
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Longueur d'onde d'excitation/émission |
633-635 nm/650-670 nm |
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Plage de pH |
7h00-7h40 à 25 degrés |
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Précision (CV) |
WBC Inférieur ou égal à 3,0%, NEUT% Inférieur ou égal à 5,0%, LYMPH% Inférieur ou égal à 5,0% |
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Corrélation ($R^2$) |
Supérieur ou égal à 0,99 |
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Durée de conservation/Stabilité du flacon ouvert |
18 mois (non ouvert) / 60 jours (ouvert) à 2 degrés – 35 degrés |
Fonction d'application et de réactif
Différentiel leucocytaire de routine en 5 parties :Colore les acides nucléiques intracellulaires pour séparer les lymphocytes, les monocytes, les neutrophiles et les éosinophiles en groupes de scattergrammes distincts.
Quantification des granulocytes immatures :Génère des signaux d’intensité fluorescente distincts pour les cellules précurseurs afin de permettre un comptage automatisé sans examen manuel des frottis.
Détection des lymphocytes atypiques :Identifie les niveaux élevés d’ARN dans les leucocytes réactifs pour déclencher des alertes analytiques automatisées.
Emballage / Stockage
Température de stockage :2 degrés –35 degrés. Conserver dans les contenants sombres d'origine, à l'abri de la lumière directe.
Spécifications du conteneur :Flacons ambrés en polyéthylène haute-densité dotés de fermetures scellées par induction-.
Conditions de transport :Certifié pour le transport de marchandises à température ambiante. Protéger des conditions de gel inférieures à 0 degré.
Réactifs d'hématologie associés
STAC-DYE-SYSWNR :Réactif colorant fluorescent pour la numération totale des globules blancs et l’analyse des globules rouges nucléés.
STAC-DYE-SYSWPC :Réactif de coloration fluorescente à haute -spécificité pour le dépistage des cellules précurseurs et des leucocytes anormaux.
STAC-DYE-SYSRET :Coloration fluorescente de l'acide nucléique pour la quantification des fractions de réticulocytes.
STAC-DYE-SYSPLT :Réactif colorant optique fluorescent pour une détermination précise des plaquettes dans des échantillons complexes.
FAQ
Q : Comment le colorant WDF empêche-t-il le chevauchement des signaux entre les neutrophiles et les éosinophiles sur les scattergrammes ?
R : La formulation fonctionne avec des réactifs de lyse compatibles qui modifient sélectivement les membranes cellulaires. Le colorant s'intercale dans l'ADN nucléaire et l'ARN cytoplasmique, générant des coordonnées distinctes d'intensité de fluorescence latérale et de diffusion latérale pour chaque population cellulaire.
Q : Quelle est la durée de stabilité des conteneurs de réactifs ouverts ?
R : Les conteneurs ouverts restent stables pendant 60 jours lorsqu'ils sont conservés entre 2 degrés et 35 degrés. La formulation du solvant empêche la dégradation des composés actifs et l’évaporation du solvant dans des conditions d’humidité standard de laboratoire.
Q : Ces réactifs colorants peuvent-ils être installés dans des conduites fluidiques sans ajustements fluidiques ?
R : Oui. Le réactif maintient une viscosité fluidique, des profils d'absorption laser et des paramètres opérationnels adaptés, permettant une connexion directe aux canaux d'écoulement correspondants.
Q : Comment la stabilité de la fluorescence d'un lot à l'autre est-elle surveillée pendant la fabrication ?
R : Les contrôles de chromatographie liquide vérifient la pureté des molécules actives pour chaque lot de production, suivis de tests de flux multi-canaux pour maintenir la dérive de positionnement des clusters de scattergrammes inférieure ou égale à 2,0 %.
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